流感病毒研究中BeaverBeads Protein A/G 抗體純化磁珠的應用
中國科學院沈陽應用生態(tài)研究所徐明愷團隊在eLife上發(fā)表的文章介紹了一個包含流感病毒保守表位和超抗原的重組蛋白誘導廣譜保護。
研究背景 每年流感疫情的爆發(fā)給公共安全造成巨大的威脅。一直以來，能夠應對新出現的流感病毒的疫苗都處于短缺狀態(tài)。為解決這一問題，結合誘導交叉保護抗體反應的保守抗原與激活交叉保護T細胞反應的表位是可采取的策略之一。
中國科學院沈陽應用生態(tài)研究所徐明愷團隊在eLife上發(fā)表的文章介紹了一個包含流感病毒保守表位和超抗原的重組蛋白誘導廣譜保護。在這次研究中，研究者設計構建了一種名叫NMHC的重組蛋白，這種蛋白包含了流感病毒的保守性表位和超級抗原片段。
NMHC重組蛋白由核蛋白NP（一種流感病毒的保守內部抗原），基質蛋白2外域M2e（一種在甲型流感病株內高度保守的多肽），血凝素莖區(qū)HA2上高度保守的α螺旋結構和SEC2（用于強化抗原性的細菌超抗原葡萄球菌腸毒素C2）組成。研究者用BeaverBeads Protein A/G抗體純化試劑盒，對血清中抗體進行純化，純化后的抗體與NMH形成穩(wěn)定絡合物的能力，后續(xù)通過pull-down實驗來確認：將抗體與NMH孵育，用BeaverBeads Protein A/G磁珠拉下NMH。分離上清，洗脫并中和磁珠上的抗體后，用SDS-PAGE分析結合與未結合上的抗體比例。
圖.重組蛋白設計、純化、復性和驗證
研究結果顯示，重組蛋白NMHC促進了B細胞和T細胞的對流感病毒感染的免疫反應。NMHC的SEC2端促進了樹狀細胞的成熟，成熟的樹狀細胞將NMH端的抗原呈現給CD4+ T細胞和CD8+ T細胞。這一過程促進了CD4+ T細胞和CD8+ T細胞的活化，增殖和分化。因此，研究者提議將NMHC作為預防多種流感的通用型疫苗備選。
BeaverBeads Protein A/G 為納米級磁性微球，適用于血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清液等樣品中的抗體純化，也可以用于抗體固定及其它研究，其優(yōu)勢：
1.具有超大比表面積、超強的抗體結合力；
2.表面親水化處理，具有較低的非特異性吸附；
3.洗脫條件溫和，一步即可從血清樣品中分離出純度>90%的抗體。
配合磁性分離器，可在10min內完成抗體吸附過程，30min內完成抗體純化流程，大幅度縮短抗體純化所需的時間。此外，配合預制緩沖液，為抗體純化實驗提供了最佳的反應條件，提高了抗體純化實驗的穩(wěn)定性。
